Photoprotective effect of verbascoside from Buddleja cordata in SKH-1 mice exposed to acute and chronic UV-B radiation / Efecto fotoprotector del verbascósido de Buddleja cordata en ratones SKH-1 expuestos de forma aguda y crónica a laradiación UV-B

Ultraviolet radiation (UVR) is involved in both sunburn and the development of skin cancer, which has a high incidence worldwide. Strategies to reduce these effects include the use of photoprotective substances. The aim of this work was to investigate the photoprotective effect of verbascoside isolated from the methanolic extract of Buddleja cordata (BCME) in SKH-1 mice exposed to acute and chronic UV-B radiation. The mouse dorsal area was evaluated macroscopically and microscopically for diagnosis; verbascoside penetration into mouse skin was investigated in vivo by the tape stripping method. After acute UV-B exposure, 100 percent of irradiated mice that had been protected with verbascoside showed no signs of sunburn or of inflammatory processes. After chronic exposure, 100 percent of unprotected mice showed skin carcinomas; in contrast, in mice topically treated with either BCME or verbascoside, the presence of lesions was decreased by 90 percent. These results prove that verbascoside penetrates through the skin of mice and suggest that verbascoside and BCME may potentially prevent photodamage on mice’s skin after acute and chronic UVR exposure.

La radiación ultravioleta (RUV) provoca quemaduras solares y el desarrollo de cáncer de piel. El objetivo de este trabajo fue investigar el efecto fotoprotector del verbascósido obtenido del extracto metanólico de Buddleja cordata (EMBC) en ratones SKH-1 expuestos a RUV-B de manera aguda y crónica. El diagnóstico histológico se llevó a cabo en la piel de la zona dorsal de los ratones. La penetración del verbascósido fue cuantificada mediante la técnica de la cinta adhesiva. En el experimento agudo, el 100 por ciento de los ratones protegidos con verbascósido no evidenciaron signos de quemadura ni procesos inflamatorios. En el experimento crónico los ratones sin protección e irradiados presentaron carcinomas cutáneos. En contraste en los ratones protegidos con EMBC o verbascósido las lesiones disminuyeron un 90 por ciento en ambos grupos. El verbascósido penetró en la piel del ratón. Los resultados sugieren que el EMBC y el verbascósido previenen el fotodaño en la piel de ratones expuestos de forma aguda o crónica a la RUV.

Estrous cycle disruptor effect of an ethanolic extract from Buddleja globosa leaves and its main component (verbascoside) / Efecto disruptor del ciclo estral de un extracto etanólico de hojas de Buddleja globosa y de su componente principal (verbascósido)

The estrous cycle disruptor effect of an ethanolic extract (EMATst) from Buddleja globosa leaves and standardized in its main component (verbascoside) was determined in rats after the subcutaneous administration of EMATst. Binding of EMATst and verbascoside to the estrogen receptor (ER) of EMATst and verbacoside was also measuredestablished. EMATst produced a significant alteration inof the estrous cycle only at the highest dose (10-5 M), which could be attributed to an antiestrogenic effect. The Bbinding of EMATst and verbascoside to the ER was competitive and occurred in concentrations 1000 times greater than that of 17beta-estradiol.

El efecto disruptor del ciclo estral de un extracto etanólico (EMATst) obtenido a partir de las hojas de Buddleja globosa y estandarizado en su componente mayoritario (verbascósido) fue determinado en ratas después de la administración subcutánea de EMATst. Se estableció además la unión al receptor estrogénico (RE) tanto de EMATst como de verbascósido. EMATst sólo a la dosis más alta (10-5M) produjo una alteración significativa del ciclo estral, lo que podría atribuirse a un efecto antiestrogénico. La unión al RE de EMATst y verbascósido se produjo a concentraciones 1000 veces mayor que el 17beta-estradiol y de forma competitiva.

Effect of different provenances and production conditions on antioxidant properties in Buddleja globosa leaves / Efecto de diferentes procedencias y condiciones de cultivo sobre propiedades antioxidantes en hojas de Buddleja globosa

Buddleja globosa Hope (matico) is a medicinal shrub native to Chile whose leaves have been traditionally used for wound and ulcer healing, pathologies associated to oxidative stress. Matico leaves display a high content of polyphenols, compounds with recognized antioxidant capacity, which may contribute to its therapeutic properties. Several factors, however, can modify the polyphenol content of matico leaf extracts, including plant material, production techniques, provenances, leaf age, harvest time, irrigation, and desiccation procedures. Thus, standardized leaf extracts prepared with plants from different provenances and harvest conditions were compared in terms of polyphenol content and their protecting antioxidant effects on rat liver microsomal lipids and thiol groups. All factors tested, but irrigation, changed both polyphenol content and antioxidant properties of matico extracts; water stress only affected their antioxidant properties without changing their polyphenol content. Correlation between polyphenol content and lipid peroxidation inhibition was only significant in the provenance study.

Buddleja globosa Hope (matico) es un arbusto medicinal nativo de Chile cuyas hojas han sido utilizadas en la medicina tradicional como cicatrizante en caso de patologías relacionadas con el estrés oxidativo. Las hojas tienen un alto contenido de polifenoles, compuestos con reconocidos efectos antioxidantes relacionados con la inhibición de la lipoperoxidación. Varios factores pueden afectar a su contenido, entre ellos el origen de la planta, edad de la hoja, momento de cosecha, riego y métodos de secado. En extractos estandarizados preparados de hojas de diferentes tratamientos se compararon el contenido de polifenoles y los efectos antioxidantes protectores de lipidos y grupos tioles microsomales. Todos los ensayos de cultivo y postcosecha mostraron diferencias significativas entre los tratamientos, excepto para la inhibición de lipoperoxidación en el tratamiento de riego. Plantas de diferente origen muestran que el contenido de polifenoles en las hojas es determinado genéticamente y sufre variaciones por efectos ambientales.

Estudio químico y farmacológico de un extracto activo de Buddleja globosa hope, buddlejaceae, matico y diseño de la metodología analítica / Chemical and pharmacological study of an active extract of Buddleja globosa hope, buddlejaceae, matico and design of analytical methodology

La evaluación farmacológica y estudios químicos de Buddleja globosa, matico, realizados anteriormente en nuestro laboratorio y la importancia terapéutica en el tratamiento de afecciones a la piel que un extracto alcohólico fraccionado ha mostrado en estudios clínicos preliminares, nos impulsaron a desarrollar un estudio químico y farmacológico detallado que permita la estandarización de este extracto, además de identificar aquellos compuestos que posean la responsabilidad farmacológica de sus actividades antiinflamatoria y analgésica. El análisis cualitativo de los extractos alcohólicos seriados de hojas recolectadas en verano y otoño (EMAT-1, ETMATverano y ETMATotoño) por cromatografía en capa fina y HPLC permitió evidenciar la presencia de cuatro compuestos mayoritarios, siendo los más abundantes verbascósido (feniletanoide) y el 7-Oglucósido de luteolina (flavona), seguido por otros dos que se denominaron MAT-3 y MAT-5. La actividad analgésica de los dos compuestos mayoritarios fue evaluada en ratones mediante los ensayos del latigazo de la cola (vía tópica y oral) y de las contorsiones abdominales inducidas por ácido acético como métodos térmicos y químicos de dolor agudo a concentraciones y dosis equimolares al EC25 ó ED25 del ibuprofeno y del naproxeno sódico, utilizados como fármacos de referencia. El verbascósido mostró un 30,25 ± 7,29% y un 27,47 ± 3,81% de actividad tópica y oral, mientras que el 7-O-glucósido de luteolina presentó 24,46 ± 3,61% y un 28,24 ± 4,99% respectivamente en el ensayo del latigazo de la cola, en su mayoría levemente superiores al ibuprofeno y al naproxeno sódico. En el ensayo de las contorsiones abdominales el efecto del verbascósido fue muy superior al de la flavona (67,6 ± 2,6% y un 27,0 ± 9,1% respectivamente). Los resultados obtenidos permitirían atribuirle, en gran parte, a estos metabolitos la propiedad analgésica de los diferentes extractos alcohólicos. Ensayos preliminares para evaluar la actividad analgésica tópica (latigazo de la cola) de dos formulaciones dermatológicas que se someterán a estudios clínicos (gel y crema conteniendo un 1% de EMAT-1) mostraron similar efecto analgésico: 47,93 ± 4,23% y 45,87 ± 6,07% respectivamente. Para la estandarización química del extracto fue necesario desarrollar una metodología analítica que permita la cuantificación de sus metabolitos activos. Se logró establecer una metodología analítica por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) obteniendo el perfil cromatográfico bajo las condiciones definidas. Se seleccionaron los patrones primarios ácido cafeico y rutina para expresar feniletanoides y flavonoides, respectivamente. Éstos permitieron la cuantificación de los principales compuestos presentes en el extracto, mediante el establecimiento de curvas de calibración. En los extractos se encontró respectivamente para verbascósido y 7-Oglucósido de luteolina: 11,43 ± 0,34% y 1,20 ± 0,03% para ETMATotoño, 24,50 ± 0,14% y 1,23 ± 0,01% para ETMATverano, 25,45 ± 0,32% y 1,26 ± 0,04% para EMAT-1 y 18,12 ± 0,10 y 1,23 ± 0,02% para un extracto metanólico global (EMG). Con estos resultados se pudo apreciar que existe variación estacional en la composición de los extractos de los feniletanoides sin variar la cantidad de flavonoides, que no existe diferencia al usar metanol o etanol en la elaboración de los extractos y la importancia de obtener extractos alcohólicos seriados al ver la disminución de la concentración de los componentes activos en el EMG, el cual no corresponde a un extracto seriado. Analizando los métodos espectrofotométricos actualmente empleados para el control de calidad de extractos de B. globosa, se comparó el método de Glories (adaptado en trabajos previos) y el de Folin-Ciocalteu con el método HPLC. Esta comparación confirmó las ventajas que posee la metodología HPLC sobre los métodos espectrofotométricos, puesto que el método de Glories presenta una baja exactitud en la expresión de los resultados debido a la interferencia que los feniletanoides generan sobre los flavonoides y que el método de Folin-Ciocalteu sólo entrega la concentración de fenoles totales hidrosolubles sin valorar particularmente a aquellos metabolitos activos de interés farmacológico.